等速電気泳動

等速電気泳動 （ ITP ）は、イオン性検体の選択的分離と濃縮に使用される分析化学の手法です。これは電気泳動の一種です。帯電した分析物は、イオン移動度に基づいて分離されます。イオン移動度は、イオンが電界を移動する速度を示す要因です。

概要

従来のITP分離では、不連続バッファーシステムが使用されます。サンプルは、高速先行電解質（LE）ゾーンと低速終端（または後続）電解質（TE）ゾーンの間に導入されます。通常、LEとTEには共通の対イオンがありますが、（対象の分析物と同じ符号の電荷を持つ）イオンは異なります：LEはイオン移動度の高いイオンによって定義され、TEはイオンとのイオンによって定義されます低イオン移動度。対象の分析物は、中間のイオン移動度を持ちます。電位を印加すると、先行電解液の電界が低くなり、終端電解液の電界が高くなります。 TEゾーンにある分析物イオンは、周囲のTEイオンよりも速く移動しますが、LEにある分析物イオンはより遅く移動します。その結果、検体はLE / TEインターフェースに集中します。

ITPは変位法です。特定の種類のイオンを集束させると、他のイオンが変位します。十分な量が存在する場合、分析物イオンの集束は、すべての電解質イオンを置換し、プラトー濃度に達する可能性があります。イオン移動度が十分に異なる複数の検体は、複数のプラトーゾーンを形成します。実際、プラトーモードITP分離は階段状のプロファイルによって容易に認識され、階段の各プラトーは電解質または分析対象ゾーンを表し（LEからTE）電界が増加し、導電率が減少します。ピークモードITPでは、分析対象物の量はプラトー濃度に達するには不十分であり、そのような分析対象物はシャープなガウスのようなピークに集中します。ピークモードITPでは、いわゆるスペーサー化合物が分析対象の中間のイオン移動度の中間に追加されない限り、分析対象のピークは強く重なります。そのようなスペーサー化合物は、隣接する分析物ゾーンを分離することができます。

完了したITP分離は、すべてのコイオンゾーンが同じ速度で移動する動的平衡によって特徴付けられます。この現象からITPはその名前を取得しました：iso =等しい、 tachos =速度、 泳動 =移動。

等速電気泳動は、不連続電気泳動の定常状態スタッキングステップとまったく同じです。

過渡ITP

ITPの一般的な形式は、一時的なITP（tITP）です。従来のITPの制限を緩和し、分析対象ゾーンのオーバーラップにより分離能力が制限されていました。一時的なITPでは、検体は最初にITPによって濃縮され、次にゾーン電気泳動によってベースライン分離できます。一時的なITPは通常、サンプルをTEに溶解し、サンプル/ TEプラグをLEゾーンに挟むことで実現します-またはその逆：サンプル/ LEプラグをTEゾーンに挟むこともできます。最初のケースでは、分析物はフロントTE / LEインターフェースに焦点を合わせます。一方、より速いLEイオンがTEイオンに打ち勝つため、TEプラグの背面がLEに溶解します。 TEイオンがすべて溶解すると、集束プロセスが停止し、ゾーン電気泳動の原理に従って分析物が分離されます。

tITPは、従来のITPよりも広く普及しています。これは、前濃縮ステップとしてキャピラリー電気泳動（CE）分離で簡単に実装できるため、強力な分離能力を活用しながらCEの感度を高めています。