知識ベース

フラグメント抗原結合

フラグメント抗原結合

抗原結合フラグメントFab )は、抗原に結合する抗体上の領域です。これは、重鎖と軽鎖のそれぞれの1つの定常ドメインと1つの可変ドメインで構成されています。可変ドメインは、モノマーのアミノ末端に相補性決定領域のセットを含むパラトープ(抗原結合部位)を含んでいます。したがって、Yの各アームは、抗原上のエピトープに結合します。

準備

実験環境では、FcおよびFabフラグメントを実験室で生成できます。酵素パパインを使用して、免疫グロブリンモノマーを2つのFabフラグメントとFcフラグメントに切断できます。逆に、酵素ペプシンはヒンジ領域の下で切断されるため、結果はF(ab ')2フラグメントとpFc'フラグメントになります。最近、F(ab ')2を生成する別の酵素が市販されています。酵素IdeS( Streptococcus pyogenesの免疫グロブリン分解酵素、商品名FabRICATOR)は、中性pHで配列特異的にIgGを切断します。 F(ab ')2フラグメントは、穏やかな還元により2つのFab'フラグメントに分割できます。

  • 抗体の重鎖と軽鎖、可変領域と定常領域。
  • パパインによって消化された抗体は、3つのフラグメントを生成します:2つのFabフラグメントと1つのFcフラグメント
  • ペプシンによって消化された抗体は、F(ab ')2フラグメントとpFc'フラグメントの2つのフラグメントを生成します

重鎖と軽鎖の可変領域を融合して、Fabフラグメントの半分のサイズでありながら親免疫グロブリンの元の特異性を保持した単鎖可変フラグメント(scFv)を形成できます。

用途

ファブは、救急医療における解毒剤としてのいくつかの治療的使用を見てきました。市販されているアプリケーションには、Digoxin免疫ファブと、ガラガラヘビにかまれたFabの混合物であるCrofabが含まれます。コルヒチンおよび三環系抗うつ薬に対するFabも生産されていますが、まだ承認されていません。

Fabは、治療用途に指定されたモノクローナル抗体の一般的なフォームファクターです。血液凝固を阻害するFabアブシキシマブは、血小板の糖タンパク質IIb / IIIaを無効にすることで機能します。セルトリズマブペゴルは、PEGに化学的に結合したFabであり、TNFαを結合することによりさまざまな炎症性疾患を治療します。

Fab抗体には診断にも使用できます。アルキツモマブ​​は、結腸直腸癌の95%で過剰発現する抗原である癌胎児性抗原を認識するマウス抗体です。放射性元素と結合しており、単光子放射型コンピューター断層撮影で見ると腫瘍を標識します。顆粒球の表面のタンパク質を認識する抗原であるスレソマブは、再び99mTc同位体を使用して、感染のラベル付けに使用されます。

多くの場合、Fabフラグメントは散乱が少ない小さなタンパク質(100 kDa)に融合され、コントラストの低い画像になります。