カルセイン
またfluorexon、フルオレセイン複合体として知られているカルセインは 、それぞれ、515分の495 nmでの励起および発光波長を有する蛍光色素であり、そしてオレンジ色の結晶の外観を有します。カルセインは70mM以上の濃度で自己消光し、一般的に脂質小胞漏出の指標として使用されます。また、EDTAによるカルシウムイオンの滴定や、カルシウムの蛍光定量のための複雑な指標としても伝統的に使用されています。
用途
カルセインの非蛍光acetomethoxy誘導体、それが細胞生存率のテストのために短期のためにそれが有用となる生細胞に細胞膜を通って輸送され得るように生物学で使用されている(カルセインAMは、AMはcetoxy Mがエチル=)細胞の標識。あるいは、Fura-2、Furaptra、Indo-1、およびエクオリンを使用してもよい。アセトメトキシ基は、Ca2 +、Mg2 +、Zn2 +およびその他のイオンをキレート化する分子の一部を覆い隠します。細胞内への輸送後、細胞内エステラーゼはアセトメトキシ基を除去し、分子は内部に閉じ込められ、強い緑色の蛍光を発します。死んだ細胞には活性エステラーゼがないため、フローサイトメトリーでは生細胞のみが標識され、カウントされます。
カルセインは、その蛍光が強アルカリ性pHでのみこれらのイオンに直接敏感であるため、Ca2 +またはMg2 +インジケーターとして使用されることはほとんどないため、細胞内のCa2 +またはMg2 +の測定には特に有用ではありません。カルセインの蛍光は、生理的pHでCo2 +、Ni2 +、Cu2 +によって強く消光され、Fe3 +およびMn2 +によってかなり消光されます。この蛍光消光応答は、ミトコンドリアの透過性移行孔(mPTP)の開口部を検出し、細胞体積の変化を測定するために活用できます。カルセインは、細胞の追跡、エンドサイトーシス、細胞遊走、ギャップ結合の研究によく使用されます。
カルセインのアセトキシメチルエステルは、多剤耐性トランスポーター1(MDR1)P糖タンパク質および多剤の優れた基質であるため、無傷の細胞で多剤耐性タンパク質 (ABCトランスポーターATP結合カセットトランスポーター遺伝子)との薬物相互作用を検出するためにも使用されます耐性関連タンパク質(MRP1)。カルセインAMアッセイは、薬物間相互作用のモデルとして、トランスポーター基質および/または阻害剤のスクリーニングに使用できます。また、患者からのサンプルを含む細胞のin vitro薬剤耐性を決定します。
カルセインは、fresh化したばかりの魚のマーキングや、生きている動物の骨のラベルにも使用されます。